【概述】肝微粒体CYP450酶活性种属差异研究

药物代谢研究贯穿整个新药研发周期，从发现阶段、临床前开发到临床开发和上市后均需进行相应代谢研究。药物代谢研究一般分为体内代谢研究和体外代谢研究。与体内代谢研究相比，体外代谢研究课直接观察候选化合物与受试靶点的选择性作用，不需要消耗大量的样品和实验动物，操作快速便捷，适用于代谢信息不明确的候选化合物进行高通量筛选。

目前，体外代谢研究已被广泛应用于新药早期的代谢评价中，主要涉及代谢稳定性、代谢酶亚型研究以及代谢相互作用等，肝微粒体是其中最重要的研究工具。肝微粒体由人或动物组织通过匀浆和离心制备，富含CYP450酶，其对肝微粒体酶活性贡献主要力量。考虑到种属之间的外推，了解细胞色素P450酶亚家族酶活的相似性和/或差异是较为重要的，以便选择合适的种属用于体外和体内研究。

迄今为止，已有许多研究比较各种属CYP450酶活性之间的差异，但多数为2-3种种属或者1-2种探针底物。Bogaards等人在同一个研究体系中研究了7个种属中9种CYP450酶活性的种属差异^[1],这些亚型酶种类与FDA和CDE在有关体外药物相互作用指导原则中所推荐研究的CYP450酶类别基本一致^[2][3]。本文简单介绍Bogaards等人的研究成果，以供参考。Boddards等人研究了小鼠、大鼠、兔、狗、小型猪、猴和人微粒体中CYP1A2、CYP2A6、CYP2B6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A、CYP4A的活性，检测这些酶的活性依次所用探针底物为乙氧基试卤灵（7-Ethoxyresorufin）、 （Coumarin）、7-乙氧基-4-(三氟甲基)     7-Ethoxy-4-trifluoromethycoumarin）、双氯芬酸（Diclofenac）、美芬妥因(S-mephenytoin)、丁呋洛尔（Bufuralol）、氯唑沙宗(Chlorzoxazone) 睾酮(Testosterone)、月桂酸(Lauric acid)。检测结果见表1-表2。

表1 CYP1A2、CYP2A6、CYP2B6、CYP2C9、CYP2C19酶活检测结果

表2 CYP2D6、CYP2E1、CYP3A、CYP4A酶活检测结果

对结果进行分析，酶活与人较为相似的物种见表3。

表3 CYP酶活与人较为相似的物种

肝微粒体是体外研究一个化合物的代谢(酶抑制，清除率和代谢鉴定)以及药物-药物相互作用的主要工具。齐氏生物提供的肝细胞微粒体，每批产品都经过严格的制备、检测，确保批次间稳定性，然后于冻存管包装，10 mg/管；-80℃保存，干冰运输。

参考文献

[1] Bogaards JJ, Bertrand M, Jackson P, et al., Determining the best animal model for human cytochrome P450 activities: a comparison of mouse, rat, rabbit, dog, micropig, monkey and man. Xenobiotica. 2000; 30:1131-52.

[2] FDA. Guidance for Industry: In Vitro Drug Interaction Studies - Cytochrome P450 Enzyme- and Transporter-mediated Drug Interactions, 2020.

[3] CDE. 药物相互作用研究指导原则(试行), 2021。